考試概要
ハ高內容篩選（HCS）是一種兼具螢光顯微鏡、流式細胞儀及高通量篩選等分析方法優勢的分析技術，有時也被稱為高內容分析（HCA）。該技術可實現基於細胞的高速影像分析，能從細胞成像、影像數據的定量分析，直至分析結果的呈現，提供一貫的分析流程。特別是在黏附性細胞的分析方面效果顯著。其特點在於能將細胞的螢光影像轉化為數值。
在藥物開發領域中，我們會針對化合物、抗體藥物、核酸藥物等進行評估，並實施以細胞為基礎的篩選試驗。此外，我們亦承接以探索化妝品及功能性食品新原料為目的的篩選試驗。更進一步地，此技術亦可應用於再生醫學領域。
本公司引進了 Operetta CLS 及 Opera Phenix Plus（Levity 公司製造）作為 HCS 儀器。Operetta CLS 及 Opera Phenix Plus 皆為具備高速與高解析度，且能因應各種應用需求的 HCS 儀器，在全球市場佔有率位居頂尖。我們將運用這些儀器，針對各類細胞進行客製化測試。
歡迎隨時與我們聯繫。
使用設備
Operetta CLS (Revvity)
Opera Phenix Plus (Revvity)
高內容分析的特點
- 可從單一細胞中取得各種定量數據
- 亦能將細胞形態、定位等特徵進行定量化
- 可高速處理大量樣本
- 可直接分析貼附細胞及三維結構體
- 從測量到分析皆為一體化流程
- 具備多種分析應用
- 可進行高階分析
影像分析應用範例
我們亦可提供分析客製化服務，以及重現其他影像設備所採用的檢測流程等服務。
對細胞等物體的準確辨識
Operetta CLS 與 Opera Phenix Plus 能夠根據成像的影像資料，自動對細胞等進行極高精度的識別。
凋亡分析範例
透過對 HeLa 細胞施加斯塔烏洛斯普林，誘導了細胞凋亡。經藥物處理 4 小時後，進行了固定。使用 DRAQ5（紅色）對細胞核進行染色，並使用 Alexa488 標記的抗 Caspase-3 抗體（綠色）對凋亡調節因子 Caspase-3 進行染色。可觀察到，Caspase-3 的活化程度（左圖）以及核凝集與核碎裂現象（右圖）均呈現出與斯塔羅斯普林濃度相關的依賴性。由此可見，針對多階段濃度（多種）的樣本，可同時分析Caspase-3活性、核大小及碎裂率等多項參數。
神經突起分析範例
將大鼠初代後根神經節細胞與星狀膠質細胞共培養4天，於施予NGF及各化合物（Comp. A、Comp. B）27小時後，以DRAQ5（紅色）染色細胞核，並以Alexa 488標記的抗Tuj1抗體（綠色）染色神經細胞。透過Tuj1染色影像識別神經突起區域，並進行面積定量分析。Operetta CLS 與 Opera Phenix Plus 能夠針對經多種濃度條件處理化合物的樣本，進行高速且高解析度的影像分析，並可透過神經突起區域的減少作為指標，來探究化合物的神經毒性濃度範圍。
其他
亦可採用 siRNA 基因敲低實驗或基因強制表達實驗進行檢測。
若為懸浮細胞，使用流式細胞儀進行分析會更為有效。
參考文獻
●寡樹突細胞分化的定量分析、組織切片上MBP含量的量化
Drug-based modulation of endogenous stem cells promotes functional remyelination in vivo
Najm FJ et al., Nature 2015
●肌管細胞分化的定量分析
Genome-Wide Exploration of miRNA Function in Mammalian Muscle Cell Differentitation
Polesskaya A et al., PlosOne 2013
●確認球體的形成
Evaluation of chemotherapeutics in a three-dimensional breast cancer model
Lovitt CJ et al., J Cancer Res Clin Oncol. 2015
●利用蛋白質間相互作用的篩選方法
Visualization and targeted disruption of protein interactions in living cells
Herce HD et al., Nat Communications 2013
●利用 BRET 測量蛋白質間的相互作用
Nanoluciferase Signal Brightness Using Furimazine Substrates Opens Bioluminescence Resonance Energy Transfer to Widefield Microscopy
Jiho Kim, Regis Grailhe., Cytometry A. 2016
※考試將由擁有博士學位的人士主導進行。
